解惑:倒置显微镜高倍观察不清晰?看看你的高倍物镜:
首先,我们来说说校正环物镜的作用:倒置显微镜上,经常会使用诸如培养皿、多孔板等各种不同类型的耗材,底部厚薄不一,这会对光线穿行造成一定的改变。此时,必须使用带有校正环功能的物镜,它的中部装有环装的调节环,当转动调节环时,可调节物镜内透镜组之间的距离,从而校正由盖玻片(培养皿)厚度不标准(常规培养皿为1.2mm,盖玻片为0.17mm)引起的像差。正确使用方法为:校正环调为标准值1.2mm,对样本对焦。校正环往右调半格,再对样本对焦,如果图像效果变好,则再往右调再对焦,反之往左调。
让我们再来说说校正环错误使用的影响:经常,我们能接到用户来电说高倍物镜看不清楚,我们通常会让他去看一看校正环对应位置对不对。因为从很多实际使用情况看来,由于使用习惯的问题(切换物镜时不是旋转物镜转盘,而是直接抓着物镜切换),校正环会在极限位置(校正环位置已经超过了2)。
切换物镜时应通过物镜转盘,养成良好的显微镜使用习惯
校正环在极限位置
zui后,让我们来说说此物镜的另一秘密作用:我们之前说到过,正置显微镜用于切片观察,倒置显微镜用于培养细胞观察。但是如果实验室没有正置显微镜,又要观察切片时,很多人会迁就下在倒置上观察。如何在倒置显微镜上得到好的荧光图像呢?这里我们也能充分利用下带校正环的物镜:把切片倒扣,盖玻片朝下,校正环调到0.17。
倒置显微镜是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微镜观察。可是上述样品特点的限制,被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,故称为"倒置显微镜"。工作距离的限制,倒置显微镜物镜的zui大放大率为60X。一般研究用倒置显微镜都配置有4X、10X、20X、及40X相差物镜,因为倒置显微镜多用于无色透明的活体观察。如果用户有特殊需要,也可以选配其它附件,用来完成微分干涉、荧光及简易偏光等观察。目前倒置显微镜广泛应用于patch-clamp ,transgene ICSI等领域。